Page 193 - Егоровские чтения

колеоптилей, отступив 5 мм от верхушки проростка. Инкубационной
средой служила дистиллированная вода. Отрезки помещали в 50-
миллилитровые бюксы с крышками, содержащие по 10 мл инкубаци­
онной среды, в которой они инкубировались в темноте при 25 °C при
периодическом покачивании. Время инкубации составляло 20 ч. С
помощью аппарата для чтения микрофильмов (Микрофот-5П01, 17-
кратное увеличение) определяли длину отрезков. Условия лабора­
торного культивирования ряски малой на смеси Гельригеля, исполь­
зованной в качестве дополнительного тест-объекта, описаны ранее
(Петров, Перк, Охлопкова, 1995). Определение активности а-амила-
зы проводили по общепринятой методике.
Препаративное выделение (рис. 1) ингибиторов роста из почек
ольховника кустарникового осуществляли по методу, описанному в
работе Корнфорта с сотр. (Cornforth, Milborrow, Ryback, Wareing,
1965) с некоторыми изменениями (Петров, 1998).

Результаты и обсуждение.
Тестирование биологической активности водных элюатов хрома­
тографических зон после разделения кислой эфирной фракции аце­
тонового экстракта покоящихся почек на бумаге в системе ИАВ
(10:1:1) практически во всех зонах выявило наличие только ингиби­
торов роста. Причем элюаты зон с Rf 0,7-1,0 существенно сильнее,
чем в других зонах тормозили рост биотеста (на 50-100%), а на учас­
тке с Rf 0,9 наблюдалось 95-100 %-ное ингибирование растяжения
клеток с частичной потерей тургора отрезков колеоптилей. Установ­
лено, что по количеству росттормозящих участков и по уровню био­
логической активности элюата зоны с Rf 0,9 почки ольховника зна­
чительно превосходили другие использованные нами растения (рис.
2).
Прежде всего, описанные результаты подтверждают общеизвест­
ный факт, что на хроматограммах после разделения кислой эфирной
фракции экстрактов почек древесных растений, как правило, обна­
руживаются только зоны, тормозящие рост биотеста. Росттормозя-
щие вещества локализуются в зонах с Rf 0,6-0,9 с максимальным
торможением роста биотеста в зонах с Rf 0,6 или 0,7, если использу­
ется система ИАВ (10:1:1) и хроматограмма разделяется на 10 зон
(Дерфлинг, 1985; Hemberg, 1961; Varga, Koves, 1959). При этом зоны
постоянной локализации максимальной активности ауксиноподоб­
ных соединений (Rf 0-0,4) и ингибиторов роста (Rf 0,5-0,8) обознача­
ли как ростовые вещества, занимающие ^-положения на хроматог­
рамме (Дерфлинг, 1985; Леопольд, 1968; Либберт, 1976). Следуя это­
му принципу, неидентифицированное вещество (Rf 0,90-0,95) из по­
чек ольховника с высокой ростингибирующей активностью нами бы-
189