Page 211 - Егоровские чтения
P. 211
гулярной” конформацией. Остальные шесть детерминант находятся
в составе а-спиралей. Очевидно, что в эпитопах, принадлежащих ле
жащим на поверхности глобулы а-спиралям, во взаимодействии с
паратопами соответствующих антител участвуют аминокислотные
остатки, направленные наружу и доступные растворителю.
б.Свойства моноклональных антител,
направленных к пероксидазе.
Были исследованы восемь клонов антител против щелочных форм
пероксидазы хрена и два клона антител, направленных против кис
лых форм фермента (Чередникова и др., 1994). Все полученные мо
ноклональные антитела (монАт) принадлежат к подклассу IgGj. Ис
следование взаимодействия монАт с кислыми и щелочными форма
ми пероксидазы методом твердофазного ИФА (иммуноферментный
анализ) выявило их специфичность по отношению к своим антиге
нам. То есть, антитела, полученные к щелочным формам пероксида
зы хрена не реагируют с кислыми изопероксидазами, и, наоборот,
антитела, направленные против кислых пероксидаз не взаимодей
ствуют со щелочными изоферментами пероксидазы хрена.
Специфичность монАт, направленных против щелочных изофер
ментов изучали конкурентным твердофазным ИФА. Результаты
анализа представлены в табл. 2. Некоторые клоны антител конкури
руют друг с другом за связывание с антигеном, другие - реагируют с
пероксидазой независимо.
Таблица 2
Результаты конкурентного анализа моноклональных антител, направленных
к щелочным изоформам пероксидазы хрена (плюсами обозначено наличие
конкуренции антител, минусами - ее отсутствие)
Тестируемые клоны
Клоны
монАт РО2
9Р 9D 2С 7G 4D ЗЕ РО1
9F + - + 4- + - 4- -
9D + - - 4- + -
2С 4- - + 4- 4- 4- -
7G 4- - J- + + + - -
4D 4- 4- + + 4- - -
ЗЕ + 4- 4- - 4- - -
РО1 + - - - не опред. - 4- 4-
РО2 - - - - не опред. - 4- 4-
Так, например, моноклональные антитела типа 9F не конкуриру
ют с антителами типа 9D, ЗЕ и РО2, за связывание с пероксидазой, а
монАт типа 4D не конкурируют с антителами типа ЗЕ, РО2 и POj за
связывание с ферментом. Такие антитела, не конкурирующие друг с
207

